Preview

Бюллетень сибирской медицины

Расширенный поиск

Убиквитин и регуляция апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat

https://doi.org/10.20538/1682-0363-2018-3-96-104

Полный текст:

Аннотация

Актуальность. Одной из актуальных задач медицины является изучение молекулярных механизмов селективного управления апоптотической гибелью опухолевых клеток в результате конформационных изменений белковых молекул (убиквитинилирования). Цель исследования: установить роль убиквитина и убиквитинлигазы в дексаметазон-индуцированном апоптозе опухолевых клеток линии Jurkat.

Материалы и методы. Интактные и культивированные при дополнительном добавлении индуктора апоптоза дексаметазона в конечной концентрации 10 мкМ опухолевые клетки линии Jurkat. Методом проточной цитофлуориметрии в интактных опухолевых клетках линии Jurkat и после предварительного воздействия дексаметазоном проводили оценку реализации апоптоза с использованием FITС-меченного аннексина V и пропидия иодида, количества FASи TNF-рецептор 1 положительных клеток со сниженным митохондриальным потенциалом. Методом вестерн-блоттинга определяли содержание транскрипционных факторов NF-κB, Apaf-1; убиквитина и убиквитинлигазы; активность каспазы-3 регистрировали спектрофлуориметрическим методом.

Результаты. При добавлении дексаметазона – индуктора апоптоза – в среду культивирования опухолевых клеток линии Jurkat установлено снижение концентрации убиквитина и возрастание содержания убиквитинлигазы на фоне активации рецепторного (увеличение доли аннексин-, FASи TNFрецептор 1 положительных клеток) и митохондриального (возрастание числа клеток со сниженным митохондриальным потенциалом и содержания транскрипционного фактора Apaf-1) путей апоптоза по сравнению с интактной культурой опухолевых клеток. Завершенность апоптоза оценивали, определяя активность каспазы-3 в изучаемых клетках.

Выводы. Полученные результаты позволяют сделать вывод о том, что процесс убиквитинилирования белков-регуляторов и белков-эффекторов программированной гибели является одним из молекулярных механизмов регуляции апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat.

Об авторах

О. Л. Носарева
Сибирский государственный медицинский университет
Россия

Носарева Ольга Леонидовна - кандидат медицинских наук, доцент, кафедра биохимии и молекулярной биологии с курсом клинической лабораторной диагностики.

634050, Томск, Московский тракт, 2



Е. А. Степовая
Сибирский государственный медицинский университет
Россия

Степовая Елена Алексеевна - докторр медицинских наук, профессор, кафедра биохимии и молекулярной биологии с курсом клинической лабораторной диагностики.

634050, Томск, Московский тракт, 2



Н. В. Рязанцева
Сибирский федеральный университет
Россия

Рязанцева Наталья Владимировна - докторр медицинских наук, профессор, ведущий научный сотрудник, лаборатория биолюминесцентных биотехнологий, Институт фундаментальной биологии и биотехнологии.

660041, Красноярск, пр. Свободный, 79



Е. В. Шахристова
Сибирский государственный медицинский университет
Россия

Шахристова Евгения Викторовна - кандидат медицинских наук, доцент, кафедра биохимии и молекулярной биологии с курсом клинической лабораторной диагностики.

634050, Томск, Московский тракт, 2



Д. С. Орлов
Сибирский государственный медицинский университет
Россия

Орлов Дмитрий Сергеевич - ассистент, кафедра биохимии и молекулярной биологии с курсом клинической лабораторной диагностики.

634050, Томск, Московский тракт, 2



В. В. Новицкий
Сибирский государственный медицинский университет
Россия

Новицкий Вячеслав Викторович - докторр медицинских наук, профессор, академик РАН, кафедра патофизиологии.

634050, Томск, Московский тракт, 2



Список литературы

1. Hampton M.B., O’Connor K.M. Peroxiredoxins and the regulation of cell death. Mol. Cells. 2016; 39 (1): 72–76. DOI: 10.14348/molcells.2016.2351.

2. Liberman A.C., Refojo D., Antunica-Noguerol M., Holsboer F., Arzt E. Underlying mechanisms of cAMPand glucocorticoid-mediated inhibition of FasL expression in activation-induced cell death. Mol. Immunol. 2012; 50 (4): 220–235. DOI: 10.1016/j.molimm.2012.01.008.

3. Ryazantseva N.V., Stepovaya E.A., Nosareva O.L., Konovalova E.V., Orlov D.S., Naumova A.I., Didenko S.A., Vesnina O.N., Shakhristova E.V., Zima A.P., Novitskii V.V. Role of heat shock protein 27 in regulation of glutathione system and apoptosis of Jurkat tumor cells and blood lymphocytes. Bull. Exp. Biol. Med. 2015; 158 (3): 377–379. DOI: 10.1007/s10517-015-2766-3.

4. Aslan M., Canatan D. Modulation of redox pathways in neutrophils from sickle cell disease patients. Exp. Hematol. 2008; 36 (11): 1535–1544. DOI: 10.1016/j.exphem.2008.07.004.

5. Martínez-Reyes I., Cuezva J.M. The H(+)-ATP synthase: a gate to ROS-mediated cell death or cell survival. Biochim. Biophys. Acta. 2014; 1837 (7): 1099–1112. DOI: 10.1016/j.bbabio.2014.03.010.

6. Цимоха А.С. Протеасомы: участие в клеточных процессах. Цитология. 2010; 52 (4): 277–300.

7. Pajares M., Jiménez-Moreno N., Dias I.H., Debelec B., Vucetic M., Fladmark K.E., Basaga H., Ribaric S., Milisav I., Cuadrado A. Redox control of protein degradation. Redox Biol. 2015; 6: 409–420. DOI: 10.1016/j.redox.2015.07.003.

8. Кайгородова Е.В., Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., Марошкина А.Н., Белкина М.В., Чечина О.Е., Çима А.П. Действие ингибиторов белков теплового шока 90 и 27 на дексаметазон-индуцированный апоптоз опухолевых клеток. Бюллетень сибирской медицины. 2010; 3: 68–72.

9. Castedo M., Hirsch T., Susin S.A., Zamzami N., Marchetti P., Macho A. et al. Sequential acquisition of mitochondrial and plasma membrane alterations during early lymphocyte apoptosis. J. Immunol. 1996; 157 (2): 512–521.

10. Perry S.W., Norman J.P., Barbieri J., Brown E.B., Gelbard H.A. Mitochondrial membrane potential probes and the proton gradient: a practical usage guide. Biotechniques. 2011; 50 (2): 98–115. DOI: 10.2144/000113610.

11. Cohen G.M. Caspases: the executioners of apoptosis. Biochem. J. 1997; 326 (1): 1–16.

12. Nicholson D.W. Caspase structure, proteolytic substrates, and function during apoptotic cell death. Cell Death Differ. 1999; 6(11): 1028–1042. DOI: 10.1038/sj.cdd.4400598.

13. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analyt. Biochem. 1976; 72: 248–254.

14. Гланц С. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. Москва: Практика, 1999: 459.

15. Green D.R., Galluzzi L., Kroemer G. Cell biology. Metabolic control of cell death. Science. 2014; 345 (6203): 1250256. DOI: 10.1126/science.1250256.

16. Kennedy D., Jдger R., Mosser D.D., Samali A. Regulation of apoptosis by heat shock proteins. IUBMB Life. 2014; 66 (5): 327–338. DOI: 10.1002/iub.1274.

17. Pandolfi J., Baz P., Fernández P., Discianni Lupi A., Payaslián F., Billordo L.A., Fainboim L., Arruvito L. Regulatory and effector T-cells are differentially modulated by dexamethasone. Clin. Immunol. 2013; 149 (3): 400–410. DOI: 10.1016/j.clim.2013.09.008.

18. Tome M.E., Jaramillo M.C., Briehl M.M. Hydrogen peroxide signaling is required for glucocorticoid-induced apoptosis in lymphoma cells. Free Radic. Biol. & medicine. 2011; 51 (11): 2048–2059. DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2011.09.002.

19. Лушников Е.Ф., Абросимов Л.Ю. Гибель клетки (апоптоз). Москва: Медицина, 2001: 192.

20. Рязанцева Н.В., Носарева О.Л., Степовая Е.А., Çакирова Е.В., Наумова А.И., Веснина О.Н., Шахристова Е.В., Орлов Д.С., Якушина В.Д., Новицкий В.В. Система глутатиона участвует в регуляции апоптоза опухолевых клеток. Бюллетень сибирской медицины. 2014; 13 (5): 73–78.

21. Driscoll P.C. Structural studies of death receptors. Meth. Enzymol. 2014; 545: 201–242. DOI: 10.1016/B978-0-12801430-1.00009-3.

22. Дубинина Е.Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток (жизнь и смерть, созидание и разрушение). Физиологические и клинико-биохимические аспекты. Санкт-Петербург: Медицинская пресса; 2006: 397.

23. Носарева О.Л., Степовая Е.А., Рязанцева Н.В., Çакирова Е.В., Мазунин И.О., Литвинова Л.С., Сохоневич Н.А., Веснина О.Н., Шахристова Е.В. Нарушения ýкспрессии мРНК Hsp27 и убиквитина как механизм ускользания опухолевых клеток линии Jurkat от апоптоза. Бюллетень сибирской медицины. 2015; 14 (1): 66–72.

24. Meier P., Morris O., Broemer M. Ubiquitin-mediated regulation of cell death, inflammation, and defense of homeostasis. Curr. Top. Dev. Biol. 2015; 114: 209–239. DOI: 10.1016/bs.ctdb.2015.07.015.

25. Dнaz V.M., Viсas-Castells R., Garcнa de Herreros A. Regulation of the protein stability of EMT transcription factors. Cell Adh. Migr. 2014; 8 (4): 418–428. DOI: 10.4161/19336918.2014.969998.


Для цитирования:


Носарева О.Л., Степовая Е.А., Рязанцева Н.В., Шахристова Е.В., Орлов Д.С., Новицкий В.В. Убиквитин и регуляция апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat. Бюллетень сибирской медицины. 2018;17(3):96-104. https://doi.org/10.20538/1682-0363-2018-3-96-104

For citation:


Nosareva O.L., Stepovaya E.A., Ryazantseva N.V., Shakhristova E.V., Orlov D.S., Novitsky V.V. Ubiquitin and regulation of apoptosis in Jurkat cells. Bulletin of Siberian Medicine. 2018;17(3):96-104. (In Russ.) https://doi.org/10.20538/1682-0363-2018-3-96-104

Просмотров: 290


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1682-0363 (Print)
ISSN 1819-3684 (Online)