Preview

Бюллетень сибирской медицины

Расширенный поиск

Совместное использование разработанных коллагенсодержащих комплексов и культуры клеток для создания новых тканевых эквивалентов

https://doi.org/10.20538/1682-0363-2016-5-75-82

Полный текст:

Аннотация

Цель исследования – оценка возможности применения созданного комплексного модуля в качестве основы клеточно-тканевого эквивалента для лечения ран кожи и мягких тканей. В рамках поставленной цели решались задачи по изучению пространственной структуры и архитектоники поверхности разработанных базовых коллагенсодержащих материалов и их биосовместимости с клеточными культурами.

Материал и методы. Проведено исследование материала, который представляет собой двухслойный пленочный комплекс, состоящий из коллагенового и полисахаридного компонентов. Коллаген выделялся из дермы и был импрегнирован мелкодисперсным деминерализованным костным матриксом (ДКМ) по оригинальной методике. Для исследования дегидратированный материал был выполнен в виде пленки. Электронно-микроскопическое исследование поверхности проведено на сканирующем электронном микроскопе JEOL JSM-IT300LV (Япония) в режиме высокого вакуума и при низких значениях тока зонда (< 0,1 нА). Исследования по оценке жизнеспособности клеток в условиях культивирования на пленках из коллагенсодержащего материала (тестирование на цитотоксичность и адгезивную способность) проводили in vitro с использованием штаммов диплоидных фибробластов человека 4–6-го пассажа. Состояние культуры оценивали визуально с помощью инвертированного микроскопа Leica DM (Carl Zeiss, Австрия), оснащенного компьютерной программой контроля роста культуры (Leica IM 1000).

Результаты. Данные, полученные при изучении структуры поверхности разработанного комплексного модуля, показали, что он представляется перспективным в качестве базового компонента клеточно-тканевой системы: наличие большого количества структурных образований для фиксации клеток и хорошо организованного барьерного слоя, способного к паро- и водопроницаемости. Таким образом, экспериментально подтверждено соответствие физических характеристик разработанного базового комплекса требованиям, предъявляемым к материалам для культивирования клеток. Показано отсутствие цитотоксичности на модели культуры дермальных фибробластов человека, что позволяет сделать вывод о возможности его использования в качестве основы клеточно-тканевого эквивалента. Полученные предварительные результаты указывают на целесообразность дальнейшего проведения экспериментов in vivo, направленных на совершенствование комплексных коллагенсодержащих материалов, разработку различных способов их применения и клиническую оценку эффективности при лечении ран различного генеза.

Об авторах

К. В. Кулакова
Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр (ПФМИЦ)
Россия

канд. биол. наук, науч. сотрудник группы консервации тканей,

603155, г. Нижний Новгород, Верхне-Волжская Набережная, 18 



Д. Я. Алейник
Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр (ПФМИЦ)
Россия

ст. науч. сотрудник, руководитель группы биотехнологий,

603155, г. Нижний Новгород, Верхне-Волжская Набережная, 18 



И. Н. Чарыкова
Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр (ПФМИЦ)
Россия

врач клинической лабораторной диагностики лаборатории биотехнологий,

603155, г. Нижний Новгород, Верхне-Волжская Набережная, 18 



Список литературы

1. Васильев М.П. Коллагеновые нити, волокнистые и пленочные материалы. Санкт-Петербург: СПГУТД, 2004: 397.

2. Shahrokhi S., Arno A., Jeschke M.G. The use of dermal substitutes in burn surgery: acute phase // Wound Repair. Regen. 2014; 22 (1): 14–22.

3. Han S.K., Yoon T.H., Lee D.G., Lee M.A., Kim W.K. Potential of human bone marrow stromal cells to accelerate wound healing in vitro // Ann. Plast. Surg. 2005; 55 (4): 414–419.

4. Liu P., Deng Z., Han S., Liu T., Wen N., Lu W., Geng X., Huang S., Jin Y. Tissue-engineered skin containing mesenchymal stem cells improves burn wounds // Artif.Organs. 2008; 32 (12): 925–931.doi:10.1111/j.1525-1594.2008.00654.x

5. Laverdet B., Micallef L., Lebreton C., Mollard J., Lataillade J.J., Coulomb B., Desmoulière A. Use of mesenchymal stem cells for cutaneous repair and skin substitute elaboration. // Pathologie Biologie. 2014; 62 (2): 108–117. doi: 10.1016/j.patbio.2014.01.002. Epub 2014 Mar 21. Review. PMID: 24661975

6. Анфимов П.Е., Краснова Н.С. Способ получения коллагена из биологического материала. Патент РФ 2322249. 20.04.2008.

7. Денисов В.М., Бугров С.Н., Анфимов П.Е. Способ получения нейтрального коллагена из биологического материала. Патент РФ 2456810. 27.07.2012.

8. Кулакова К.В., Бугров С.Н., Алейник Д.Я., Чарыкова И.Н., Сидорова Т.И., Стручков А.А. Клеточно-тканевые комплексы для восстановления дефектов кожного покрова // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2016; 4 (4): 703–706.

9. Денисов В.М., Анфимов П.Е., Краснова Н.С., Куприянов В.А., Стручков А.А. Пленочное покрытие для ран. Патент РФ 2136318. 10.09.1999.

10. Грязнухин Э.Г., Савельев В.И., Анисимова Л.О. Лечение ран под биологическим струпом из размельченной деминерализованной костной ткани // Современные подходы к разработке ýффективных перевязочных средств, шовных материалов и полимерных имплантатов. М., 1998: 60–62.

11. Мовсарова Ç.М. Лечение ран с использованием размельченной деминерализованной костной ткани: автореф. дис. ... канд. мед. наук. СПб., 1998: 21 с.

12. Greenholgh D. Role of growth factors in wound healing // J. Trauma. 1996; 41 (1): 159–167.

13. Стручков А.А., Анфимов П.Е., Кулакова К.В., Бугров С.Н. Применение раневого покрытия «Биотекст» для местного лечения ожогов // Вопросы травматологии и ортопедии. 2012; 2: 16–17.

14. Кулакова К.В., Бугров С.Н., Алейник Д.Я., Стручков А.А. Результаты применения разрабатываемых биологически активных материалов на основе коллагена для замещения тканевых дефектов в эксперименте // Технологии живых систем. 2013; 10 (8): 59–64.


Для цитирования:


Кулакова К.В., Алейник Д.Я., Чарыкова И.Н. Совместное использование разработанных коллагенсодержащих комплексов и культуры клеток для создания новых тканевых эквивалентов. Бюллетень сибирской медицины. 2016;15(5):75-82. https://doi.org/10.20538/1682-0363-2016-5-75-82

For citation:


Kulakova K.V., Aleynik D.Y., Charykova I.N. Joint use of developed collagen-containing complexes and cell cultures in creating new tissue equivalents. Bulletin of Siberian Medicine. 2016;15(5):75-82. (In Russ.) https://doi.org/10.20538/1682-0363-2016-5-75-82

Просмотров: 245


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1682-0363 (Print)
ISSN 1819-3684 (Online)